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气相色谱-质谱联合应用于脂肪分析

发布时间:2011-07-30   来源:11317仪器商城  

                                        气相色谱-质谱联合应用于脂肪分析

编辑:113仪器商城

  羊脂油作为常用炮制辅料,尚未制订其药用质量标准,仅在食品标准中对其外观形状等制订了一些理化指标限度要求。为了规范羊脂油的使用,本研究首次采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其脂肪酸类成分进行分析,以期对其质量标准研究提供实验数据[2]。

  羊脂油来源于牛科动物山羊CaprahircusLinnaeus或绵羊OvisariesLinnaeus的脂肪油,甘、温,具有补虚、润燥、祛风、解毒的功效,主要治疗虚劳羸瘦、久痢、口干便秘、肌肤皲裂等症[1]。用本品炮制药材能够达到“增效”的目的,如羊脂油炙淫羊藿,可以增强淫羊藿的温肾助阳作用[2]。

TraceGC-MS气质联用色谱仪,FID检测器。

色谱条件:HP-5(0.25μm×30m,0.25mm)毛细管柱;程序升温,初始温度100℃,保持5min,以8℃/min升至180℃,再以28℃/min升至230℃;进样口温度250℃;载气N2;检测器温度250℃;分流比为20∶1;进样量0.1μl。

质谱条件:离子源为EI;电子能量70eV;离子源温度200℃;接口温度250℃;溶剂切割4min;扫描质量范围m/z35~688;扫描周期0.6s/dec,用NIST标准质谱库检索。

羊脂油购自北京清真食品公司,经本文作者鉴定为牛科动物绵羊Ovisarieslinnaeus的脂肪油。

样品制备取羊脂油样品200g切成小块,于120℃炼制,待出油量不再增加,去渣取油,备用。

供试品溶液制备取0.4g羊油样品,置于50ml锥形瓶,加入15ml0.5mol/L的KOH-MeOH溶液,于60℃水浴20~30min,至黄色油珠完全消失为止,冷却后,再加10ml14%的三氟化硼乙醚溶液,水浴5min,取出冷却后,加入10ml正己烷和10ml氯化钠饱和溶液,振摇,取上层溶液备用。

样品测定对羊脂油样品的总离子流色谱图通过NIST标准质谱库进行检索,并结合相关资料进行人工解析,确认了18种成分,归一化法计算出各峰面积的相对百分含量。见表1。表1羊脂油的脂肪酸类成分组成

羊脂油所含长链脂肪酸甘油酯[1]具有很高的沸点,如果直接进行分析,高温下脂肪酸甘油酯易分解;并且在色谱柱上如果要使各组分能够按脂肪酸的不饱和度分离,应使用极性固定相,而该类固定相的耐温性较差,从而限制了这种方法的应用。因此一般都要进行前处理,即脂肪酸衍生化,将脂肪酸甲酯化或乙酯化,一般选择甲酯化的方法,并以三氟化硼-甲醇法常用[3]。

本实验以120℃炼制的羊脂油为样品,采用三氟化硼-甲醇法对样品进行甲酯化处理,其产物经GC-MS分析,取得满意的分离效果,经NIST谱图库检索,从中检出16种脂肪酸成分,占总气相色谱峰面积的94.61%。通过与标准谱图对照,分析,确定每一个成分的化学结构,按峰面积百分比法进行定量分析,分别求得各组成化合物的相对含量见表1,结果显示羊脂油所含不饱和脂肪酸有9种,包括油酸(34.45%)、反式9-十八碳烯酸(10.16%)、Z-11-十八碳烯酸甲酯(3.30%)、棕榈油酸(2.03%)、7,10-十八碳二烯酸酸(1.69%)、亚油酸(1.37%)、2-己基环丙烷酸(1.09%)、10-十九烯酸(0.24%)、Z-11-十四碳烯酸甲酯(0.15%);饱和脂肪酸有7种,包括棕榈酸(21.59%)、硬脂酸(13.49%)、肉豆蔻酸(2.15%)、十七烷酸(1.34%)、十五烷酸(0.60%)、14-甲基棕榈酸(0.60%)、15-甲基棕榈酸(0.36%)。本实验结果与文献报道[1]相符,并进一步增加了成分的组成。

实验结果显示,羊脂油中油酸和棕榈酸的含量更高,二者的含量已经超过总脂肪酸量的50%,均具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗血小板聚集以及抗血栓形成等作用,此外亚油酸是人体必需的脂肪酸,具有防止血栓形成、软化血管、调节脂肪代谢,降低血中胆固醇的作用。

本实验对羊脂油的成分进行了初步研究,为该炮制辅料其真伪优劣的质量评价提供了切实可行的分析方法,为其质量标准的制定提供了实验数据。各地羊脂油的气相色谱分析结果将另文发表,其对所炮制饮片药理作用的影响正在进一步研究中。

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